石棉的细胞遗传学效应的探讨杨文秀张勇金焕荣赵肃王风芝张迪沈阳医学院预防医学系壅壅!堕壅：壅壅1990年第2卷第3期摘要本文报告了石棉引起矿工末稍血稻小鼠骨髓细胞的细胞遗传学效应，实验结果表明，石棉浸出液可以引起小鼠骨髓细胞的染色体畸变，姐妹染色单体交换频率和微核率明显升高，同时亦能引起石棉工人末稍血淋巴细胞的微核率升高，并与工龄相关。说明石棉可以引起染色体畸变和DNA损伤。T．、关键词石棉；硅酸盐’染色体畸变；微核，姐妹染色单体交换石棉可诱发肺癌和间皮瘤，但致癌作用机理尚不清楚，1989年Jackson发现石棉与吸烟有协同作用，可引起DNA断裂和羟基(OH)增多…。关于石棉对基因突变作用，、报导甚少，且有出入。1980年碰ght等人提出石棉对细菌无致突变作用【21。1984年Clc— veland发现石棉对大肠杆菌(CSHso)有致突变作用Ⅲ．j为探讨石棉对哺乳幼物体内染色体及DNA的损伤作用，本文应用小鼠骨髓细胞染色体畸变、微核、SCE和矿工末稍血淋巴细胞微核试验进行研究。材料和方法实验样品：石棉由朝阳新生石棉矿提供三级纯的温石棉，主要化学成份为．sioz占36．44％、M903．7％、Ca08嘏1％，F：e4Q。0．46％等。应用二甲基皿砜【DMS!D)，正己烷(he．．xane)、二氯甲烷(methylcaechloridc)、甲苯(tolucno)和乙腈(acewnitril)五种蓿科浸泡石棉，即石棉209,坶冬EDMsO或面鼋l烷200ml，放振荡器振荡2小时，37℃恒温箱24小时，离心取上清液、微温蒸发浓缩至5ml，浓度相当29／ml。又因二氯甲烷。甲苯和乙腈毒性较强，微量可使小鼠死亡，故按上法浸出后，将三种上清液汇集在_起蒸干后，再加／k．Sml玉米油制成混悬掖备用。实验动物：昆明种小鼠和纯株系BALB／c小鼠均由中国医大实验动物部提供。矿工为朝阳新生石棉矿大集体和国家的工人，男女皆有、工龄1年以上。作业车间空气中石棉浓度(计重法和计数／法)均超过国家标准。(计数法按OSHA美国职业安全及健康协会5f／cc的标准)。实验方法：SCE试验方法，参照king和复旦大学生物系的改良方法f¨51。采用SCE敏感的纯株系BALB／C雄性小鼠、，体重10"--，259，分为5组，每组2只，石棉的DMSO浸出液剂量为2，4，209／船，阻性对照为环碑酰胺(CP)lOmg／kg，．腹腔注射，每鼠皮下埋植lSmSBUdR(5-Bromodeoxy幽idine)琼脂胶囊、术后立即注射10％醇母溶液Kj每log鼠莺0．1mt。4小时，腹腔注射石棉浸出液，。处死前2小时海射秋水讪索埋植2垂小时后，脱颈椎处死小鼠，取骨髓制片。每只动物计数2S+．第--周期分散良好韵中期，钿，胞，记录SCE数嗣，以每个缎腮的SG骂数表示。‘染色体畸变，，按照oEc岭规定的常规方法，采用昆明种，体嚣1驾～颦g小鼠30只，雌雄各半，．分为5组，石棉的DMSO浸液剂量为2，4，10Slkg，cp为5,0mg／kg，两次灌胃染毒，间隔24小时-．第二次灌胃后6小时，脱颈椎处死小鼠一取骨髓制片。观察50个中期细胞数，记录畸变类型及畸变数，以细胞畸变率表示。微核试验，按照Schmld方法【6】，采用昆明种雄性小鼠，体重17～239，随机分为13组、每组5只，实验组为石棉的DMSO、正己烷浸液及玉米油混悬液，每组浸出液均采用2，4，209／kg---个剂量，cp为lOOmg／kg，阴性对照为DMSO，正己烷和玉米油。染毒方式同染色体畸变，每只动物观察1000个嗜多染红细胞、计数微核细胞数目、以千分率表示。矿工末稍血淋巴细胞微核试验，取耳血50～lOo“l，注入微量试管，加入l／3～1／z0．3％甲基纤微素溶液，搅拌、放温箱沉淀45分，吸取自血球层，离心，沉淀物制片、计数1000个大淋巴细胞，其它同上。阴性对照组采用上海报导的正常人淋巴细胞微核率(0．3‰)作为总体率【”。‘结果实验结果见表l-表5。表1各组染色体畸变类型及频率组别剂量(glkg)中期细胞畸变类型畸变频率(I) b f d r pIn gr dic畸变次潜(II)II／I范铟(％)DMSO31·00-2CPO． l2131t2．0。21—63石棉DMSO浸出液234·3。0-·7。0—·3’2-6 b dP m qr01注 l断裂f l断片 t缺失f l环 l粉碎 l微小体。四射体dlc双看丝恩。r≮t，·裹2各组$CE苴按频率‘1．、删(强蝴中帮胞—面面__=孟矿_DMSO一‘1,2±1,0‘CP石棉DMSO漫出液0．．1±6．9。2．5±1．3’2．6±1．5‘·1±2·O’———————————————————————“———“—‘—9—4—”—●_“————“’。—一·YI／I·P